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Co-IP

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一、技术简介

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)是利用抗原和抗体的特异性结合以及细菌的ProteinA或G特异性地结合到免疫球蛋白的Fc片段的现象开发出来的方法。其基本原理是,为了研究细胞中蛋白A与蛋白B是否结合,在细胞裂解液中加入抗蛋白A的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Agarose珠上的ProteinA或G,若细胞中有与蛋白A结合的蛋白B,就可以形成这样一种复合物:“蛋白B-蛋白A-抗蛋白A抗体-agarose Protein A或G”,经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物又被分开。然后经免疫印迹或质谱检测蛋白B。

 

二、实验流程

 

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