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胎牛血清常见问题汇总

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胎牛血清常见问题汇总

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【摘要】:
细胞在单纯的培养基中不能存活,在特殊类型的细胞培养中必须提供某些营养物质和生长因子才能是细胞得以生长并维持生长状态。基础培养基常常要添加血清,胎牛血清中富含有丝分裂因子,常选其做增殖细胞用的血清,也用于细胞系和原代培养。

 

细胞在单纯的培养基中不能存活,在特殊类型的细胞培养中必须提供某些营养物质和生长因子才能是细胞得以生长并维持生长状态。基础培养基常常要添加血清,胎牛血清中富含有丝分裂因子,常选其做增殖细胞用的血清,也用于细胞系和原代培养。


QUESTION1

 

 


Q血清在细胞培养中的有哪些主要作用?

A

  1. 提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。

  2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。

  3. 有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。。

  4. 是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

  5. 起酸碱度缓冲液作用。

  6. 提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。

 


QUESTION2


Q:胎牛血清与其他牛血清的区别?

A血清是一种复杂的混合物,由血浆去除纤维蛋白而得,为细胞培养和生长提供各类支持和保护作用,且其中成分组成随供血动物的年龄不同有较大差异。

胎牛血清取自剖腹产的胎牛;新生牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。胎牛血清因胎牛还没有接触外界,血清中所含对细胞有害的成分如抗体和补体等是最少的,故其品质比其他种类牛血清更好。

 


QUESTION3

 

Q:胎牛血清应如何保存?

A胎牛血清长期保存需储存于-20℃或-80℃低温冰箱,一般-80℃可以保存5年以上。

反复冻融很容易会影响血清品质,建议将血清分装成一次性能使用完的量(如50ml),并且预留一定体积空间,因为血清结冰体积会增加大约10%,易发生污染或玻璃瓶冻裂。

 


QUESTION4


Q:胎牛血清应如何融解?

A胎牛血清的解冻融解切忌直接把血清从-20℃放入室温或37℃,因为较大的温度差极易引起蛋白凝集而出现沉淀。

应采取逐步解冻的方式:-20℃或-80℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中过夜融解,过程中可以时而轻轻旋转摇晃使温度与成分均一,充分解冻后再分装或平衡至室温后再使用。


QUESTION5


Q:血清热灭活有什么作用?

A:热灭活的主要作用是可以有效破坏血清中的补体系统。激活的补体参与到多种生物学事件,包括溶解细胞、刺激平滑肌收缩、细胞和血小板释放组胺、激活淋巴细胞和巨噬细胞等等。 因此特别在免疫学研究,如培养胚胎干细胞以及平滑肌细胞等,一般建议可以使用经热灭活的胎牛血清。

血清的热灭活一般建议是56℃、30分钟水浴加热已按正规解冻流程解冻的血清,同时水浴过程中须不时摇晃均匀血清。