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贝赛小科普|关于动物模型的那些事(二)

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贝赛小科普|关于动物模型的那些事(二)

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【摘要】:
诱发性疾病模型是指通过物理、化学、生物等致病因素人工诱发动物产生某些类似人类疾病的模型。


 

(诱发性疾病模型的分类图)

 

 外科手术模型

 

<小鼠急性心肌梗死模型>

方法:结扎小鼠左前降支(LAD)

     ①皮肤切口:脱毛,酒精消毒后,沿小鼠左侧胸大肌下缘作一斜向小鼠左上肢等斜行皮肤切口,在切口处预先缝上线等待操作完成后直接闭合皮肤切口。

     ②用镊子夹起胸大肌下缘,在尽量靠下处,垂直胸大肌下缘向左侧胸骨处钝性分离,在胸骨附近可找到胸小肌,夹起胸小肌用钝头直镊稍作分离即可清楚地看到左侧肋骨和肋间隙。

     ③在肋间隙处用血管钳钝性分离,挤压出心脏,沿心脏表面到心间位置的静脉末端分叉位置前后的左动脉前降支位置进行结扎。

      ④结扎完毕后关胸,收紧预先缝在切口处的缝线以闭合皮肤切口,操作完成。 

 

(小鼠急性心肌梗死模型操作流程图)

 

<脑缺血再灌注模型>

方法:动脉阻塞法(MCAO)     

     ①分离CCA(颈总动脉),ICA(颈内动脉)和ECA(颈外动脉)的分叉,在ECA上下打结,中间引入线栓,剪断切口,将线栓插入ICA,造成MCA堵塞。

     ②缺氧1-1.5h之后拔出线栓。

     ③术后24h对小鼠进行NSS评分,用TTC染色法测定小鼠脑梗死面积占全脑组织体积对百分比。

(小鼠脑缺血再灌注操作示意图)

 

<人源肿瘤组织来源移植瘤模型>

      将人类肿瘤移植到动物体内,经传代后,成活率、生长速度、肿瘤寿命、侵袭和转移等生物学特性稳定。

      原位移植——肺、肝脏、肾脏、卵巢等      异位移植——皮下移植

方法:采用外科手术方法将处理后的1-3mm3(立方毫米)肿瘤组织移植到F0代免疫缺陷鼠(NOD/SCIDNOD/SCID IL-2Ry重链敲除鼠)或者裸鼠的四肢后侧,根据不同肿瘤组织的生长速度不同,等到肿瘤体积增长至1-2cm2(平方厘米)处死取瘤,逐代移植(不超过3代)以此为模型进行相关药物筛选等转化医学研究。

(人源肿瘤组织来源移植瘤操作流程示意图)

 

 

物理诱导模型

 

<颅外伤模型>

方法:应用液压冲击颅脑损伤仪(FPI)

       损伤前、损伤后1、3d, 1、2、4、6、8周行F-VEP(双眼闪光视觉诱发电位)和MRI(视神经核磁共振成像)检查,观察和评价动物模型。进一步对视网膜组织进行病理学及TUNEL检测,临床观察后得到相应动物模型。

 

 化学诱导模型

 

<慢性支气管炎和肺炎模型>  

方法:应用SO2(二氧化硫)、烟雾、甲醛蒸气、辣性气体等制备诱发性大鼠、小鼠的慢性支气管炎动物模型。

 

<溃疡性结肠炎模型>

方法:DSS(硫酸葡聚糖)法

      取近交系小鼠,在饮用水中添加浓度为3%DSS自由饮用5d,根据实验过程中小鼠的体况、处死后肠粘膜外观、病灶染色进行观察评价,得到符合要求的模型动物。


食物诱导模型

<II型糖尿病小鼠模型>

方法:链脲佐菌素+高脂高糖饲料喂养

      选用客户指定品系和性别的小鼠,用链脲佐菌素造模,使用特殊高脂高糖饲养八周后成模。注射3d后空腹血糖浓度≥16.7mmol/L纳入正式实验,实验期间内小鼠血糖均保持在高水平状态有统计学意义,并出现典型的糖尿病症状:多饮多食、多尿、消瘦、动作迟缓、毛发无光泽等。

 

生物诱导模型    

 

<小鼠肿瘤细胞移植模型>

方法:细胞悬液尾静脉注射

       取对数生长的细胞,胰酶消化后培养基重悬收集细胞,用无菌磷酸盐缓冲液(PBS)调整细胞密度备用。选用近交系小鼠建立细胞肿瘤转移模型。根据模型成瘤时间,成瘤率以及生存期选择合适细胞浓度进行尾静脉注射。建立一种符合研究时间窗口期需求,有适当时间处理,观察和评价的肿瘤动物模型。进一步对病灶进行组织病理学检测,临床观察。

(小鼠肿瘤细胞异种移植示意图)