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转基因小鼠

定义:将特定的外源目的基因转移到小鼠基因组中,实现外源基因的过表达,使小鼠产生可预期的、定向的遗传改变。

分类:根据插入位点是否确定,可分为随机转基因和定点转基因
 
1、随机转基因小鼠
制备流程:构建表达载体—>显微注射受精卵—>胚胎移植假孕母鼠—>鉴定并验证F0代—>获得阳性鼠
 
2、定点转基因
Rosa26位点是目前最为常用的定点整合位点之一。它位于小鼠6号染色体,是一个非编码基因,已被证明在大部分组织和细胞中都有表达。表达比较活跃的基因区域因为需要转录因子的进入基因组结构不会被异染色质化,因此在这个区域定点插入外源DNA,在各组织中表达的可能性都非常高。所以,Rosa26被广泛用来作为外源基因表达的安全位点。
 
特点:
(1)获得模型唯一,不影响内源性基因表达
(2)遗传稳定性高
(3)无需筛选分析