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定点条件性基因过表达小鼠

定义:在小鼠特定组织或者器官中,基因进行表达(组织特异性);在小鼠的特定生长时期,基因进行表达(时间特异性)。
 
原理:利用Cre-LoxP系统对目的基因进行可诱导表达调控。构建Rosa26-(SA/pCAG)-loxp-Stop-loxp-cDNA-pA 重组载体,将条件性过表达结构插入到Rosa26基因intron1中。该类型Knockin小鼠可与各类表达Cre重组酶的工具鼠杂交,获得组织特异性表达外源基因的条件性过表达小鼠模型。
 
 
组织特异性过表达
 
  
时间特异性过表达(在他莫昔芬的诱导下,CreERT表现出核酸酶活性)
 
特点:
 
(1)可避免随机整合转基因模型中多拷贝数、多位点插入、表达不稳定、需要建系等烦恼
 
(2)可实现外源基因稳定的可调控表达,避免全身性基因过表达可能导致的不可预测的异常表型
 
(3)可进行超大片段(20-30kb)定点整合
 
(4)除Rosa26位点以外,另有多个位点可供选用,满足不同研究需求
 
(5)可用于基因功能、蛋白功能的过表达研究
 
(6)可用于KO表型的Rescue实验
 
(7)可用于在没有人同源基因的情况下的人源基因表达模型
 
(8)可用于人类疾病基因突变