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Pull down

Pull down

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一、技术简介

  在Pull down实验中,带有标签的诱饵蛋白被特异结合该标签的固相化亲和配基捕获,产生“次级亲和支持物”,用于纯化与诱饵蛋白相互作用的其他蛋白。固相化诱饵蛋白的次级亲和支持物可以与含有推测猎物蛋白的各种蛋白样品相互孵育,如果缓冲液及样品条件与靶结合相互作用兼容,且诱饵蛋白在带有标签和被固相化时仍然可以行使功能,那么存在于样品中的猎物蛋白就会结合到亲和支持物上,“诱饵-猎物复合体”可从支持物上洗脱下来。

二、实验流程

 

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