mRNA前体的剪接是真核生物中基因表达的关键步骤。剪接异常会引起基因表达量异常、蛋白质功能改变,是疾病发生的常见原因。
minigene技术是一项针对突变位点进行体外生物学验证的技术。通过克隆带有变异位点(包括剪切位点附近以及深度内含子中的点突变、插入及缺失等变异类型)的目标基因组片段,构建重组表达载体,转染细胞株,RNA抽取及cDNA反转,再利用电泳和测序技术验证该突变对mRNA剪接的影响(外显子缺失,内含子滞留等)。

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